（l）营养 猴头菌驯化栽培成功后，可利用的碳源相当广泛，如锯木屑、甘蔗渣、棉籽壳（药用猴头菌忌用）、玉米芯和粉碎的稻草等。培养基含氮量以0.6％为宜。自然界树皮中氮含量较心材高，可满足其生长需要。人工培养时可在培养料中加人麦麸或米糠。猴头菌生长也需要磷、钾、锌、铜、铁等营养元素来提高菌丝的生理活性。此外，还需要一定量的维生素，尤其是硫胺素。一般从米糠等培养料中能得到满足。
（2）温度 猴头菌为中温性真菌。菌丝生长温度范围是6－30℃，生长温度25℃左右，温度过高菌丝生长细而稀，超过35℃菌丝完全停止生长。子实体形成温度以15－20℃为适宜，低于14℃子实体变红，并随温度下降而颜色加深，温度高，子实体的刺长，球块小、松，且常常形成分枝状，25℃原基分化数量也明显降低，30℃不能形成原基。
（3）湿度 猴头菌生活的基质含水量和其基质的松紧度密切相关。培养基质地坚实的要求较低含水量，含水40％即可，如椴木。反之要求较高的含水量，如蔗渣基质，含水则以65％－70％为宜。菌丝生长期间，空气相对湿度不宜超过65％。猴头菌原基形成后，控制温度85％－95％。如低于90%时子实体表面开始失水干萎，刺较短，生长缓慢、产量低。如果湿度超过95％，又会因通气不良致使子实体畸形，多数表现为刺短，子实体分枝状，球块小严重时不形成球块。
（4）空气 猴头菌是一种好氧菌类。对二氧化碳浓度十分敏感。菌丝生长阶段，一般能忍受0.3％－1％，甚至更高浓度的二氧化碳含量。子实体生长阶段对二氧化碳的含量极为敏感。通风不良，子实体不易分化或柄拉长，并会产生分枝，且刺弯凹成畸形，甚至影响到球心发育形成珊瑚状分枝。一股子实体生长时，二氧化碳含量以不超过0.l％为好。
（5）光照 菌丝体生长阶段不需要光，而子实体分化发育阶段需要有微弱光照，有助于子实体正常形成。光照度10一50勒克斯。
（6）酸碱度 基质的pH为4。当pH大于7.5时，菌丝难以生长。在琼脂培养基中通常用苹果酸或柠檬酸酸化。在袋料栽培配制培养基时，按pH提高1－2即PH5－6为宜。
